Nucleic acid amplification / Amplificazione degli acidi nucleici
Nucleic acid amplification / Amplificazione degli acidi nucleici
Segnalato dal Dott. Giuseppe Cotellessa / Reported by Dr. Giuseppe Cotellessa
We offer a comprehensive portfolio of reverse transcriptases (RTs), from the wild-type Moloney murine leukemia virus (M-MuLV) RT to the Invitrogen™ SuperScript™ line of RTs with superior characteristics such as enhanced sensitivity and reduced reaction time.
Our proprietary in vitro protein evolution technology has enabled the introduction of multiple favorable mutations into the traditional M-MuLV RT. This has dramatically improved the enzyme’s thermostability, tolerance for inhibitors, and processivity.
Benefits
• Robust performance with challenging samples
• Enhanced thermostability and processivity
• High efficiency and sensitivity, even in the presence of inhibitors
• Minimal false-positive results with low residual host-cell DNA
• Lyophilization compatibility with lyo-ready formulation
Featured RT: SuperScript IV RT Invitrogen™ SuperScript™ IV RT is an M-MuLV RT mutant with superior robustness and reliability in cDNA synthesis. This RT enzyme exhibits strong inhibitor tolerance, high processivity, thermostability, highly efficient full-length cDNA synthesis, and reduced RNase H activity. SuperScript IV RT demonstrates its ability to carry out reliable cDNA synthesis in the presence of common PCR reaction inhibitors, which are typical in situations where biological samples of optimal quality are not available.
Highlights
• Robust cDNA synthesis with a variety of gene targets, including degraded RNA and RNA samples of suboptimal purity
• High sensitivity and linearity in a 10-minute reaction
• Linear dynamic range across a broad range of RNA input, crucial for detection of low-abundance targets
• Extensive quality testing
DNA polymerases
Taq DNA polymerases
We are dedicated to providing PCR enzymes that meet the most demanding customer requirements. Our knowledge and experience in enzymology and in vitro evolution allow us to develop enzymes with new or improved properties. Our customers can select enzymes from a spectrum of DNA polymerases based on a combination of hot-start technology, speed, level of tolerance for PCR inhibitors, or lyophilization compatibility. High performance, lot-to-lot consistency, and extensive quality-control testing enable the highest sensitivity, accuracy, and reproducibility of PCR and real-time PCR (qPCR) assays developed with our enzymes.
Benefits
• High sensitivity and specificity for detection of low-copy DNA targets
• Minimal activation time for faster time-to-results
• Robust amplification of difficult-to-amplify targets, including those of suboptimal purity
• Lyophilization-compatible (lyo-ready) formulations available
Featured Taq DNA polymerase: Platinum II Taq Hot-Start DNA Polymerase
Invitrogen™ Platinum™ II Taq Hot-Start DNA Polymerase combines an enzyme engineered for speed and inhibitor tolerance with a proprietary buffer that allows for a universal primer annealing temperature. These attributes, combined with a robust hot-start feature, open new possibilities in DNA- and RNA-based assay designs.
Highlights
• Universal primer annealing buffer reduces tedious optimization steps and helps save time by enabling co-cycling of all assays
• Engineered Taq DNA polymerase allows fast cycling, even in the presence of inhibitors
• Platinum hot-start technology offers superior specificity, sensitivity, and yields
• Extensive quality testing
High-fidelity DNA polymerases
Thermo Scientific™ and Invitrogen™ high-fidelity DNA polymerases are designed to amplify DNA fragments with exceptional robustness and fidelity, and to generate PCR products with high accuracy and speed, even with the most difficult templates. Choose from a collection of our high-fidelity enzymes: their formats, buffers, and dNTP solutions vary depending on the sophistication of your DNA-based assay and your needs for flexibility.
Benefits
• Highest fidelity on the market (>100x Taq polymerase)
• Robust amplification of versatile targets, up to 20 kb
• Exceptional tolerance of PCR inhibitors
• Shorter cycling times for faster time-to-results
• High yields without optimization
• Minimal nonspecific amplification
• Available as a stand-alone enzyme or in a master mix format
Featured high-fidelity DNA polymerase: Platinum SuperFi II DNA Polymerase
Invitrogen™ Platinum™ SuperFi™ II DNA Polymerase is designed for success in PCR, combining the highest fidelity with trusted Invitrogen™ Platinum™ hot-start technology. Featuring >300x the fidelity of Taq polymerase, Platinum SuperFi II DNA Polymerase is ideally suited for applications benefiting from supreme sequence accuracy.
Highlights
• Exceptionally high fidelity (>300x higher fidelity than Taq polymerase)
• High specificity and increased yields with Platinum hot-start technology
• Robust amplification of a wide range of targets with tolerance of common PCR inhibitors
• Convenient workflow with room-temperature reaction setup and 24-hour benchtop stability of preassembled reactions
• Extensive quality testing.
EquiPhi29 DNA Polymerase
Thermo Scientific™ EquiPhi29™ DNA Polymerase is a proprietary phi29 isothermal DNA polymerase mutant developed through in vitro protein evolution. This enzyme is significantly improved over phi29 DNA polymerase in protein thermostability, reaction speed, product yield, and amplification bias, while retaining all the benefits of the wild-type enzyme, including high processivity (>70 kb), strong strand displacement activity, and 3ʹ to 5ʹ exonuclease (proofreading) activity acting preferentially on singlestranded DNA or RNA.
Highlights
• Lowest amplification bias offered in the market
• Extremely high yields of amplified DNA, even from minute amounts of template
• Highly accurate DNA synthesis in a short amount of time
• Available in lyo-ready format
PCR-grade dNTPs
We are one of the few primary manufacturers of nucleotides. Our deoxyribonucleoside triphosphates (dNTPs) have been extensively tested and verified for use in a wide variety of molecular biology applications, including highly sensitive techniques such as RT-qPCR and next-generation sequencing.
Highlights
• >99% purity confirmed by HPLC
• Manufactured using dedicated equipment for each dNTP
• Free of contaminating RNases, DNases, and qPCR, PCR, and RT inhibitors
• High stability with a 48-month shelf life at –20°C; stable after >100 freeze/thaw cycles
• No limitations to manufacturing scale
• Available as individual dNTPs, sets, or mixes
qPCR master mixes
Real-time PCR master mixes
Applied Biosystems™ TaqPath™ and TaqMan® master mixes provide turnkey solutions for real-time PCR. They contain buffer, dNTPs, passive reference dye, thermostable hot-start DNA polymerase, and other components formulated for reliable 5ʹ nuclease–based real-time PCR. Just add your sample and TaqMan® Assay components, and start your reactions. We offer a range of real-time PCR master mixes optimized for specific applications, and provide TaqMan master mixes for Research Use Only (RUO), as well as TaqPath master mixes, which are general purpose reagents (GPRs), for laboratory use. Find out more at thermofisher.com/taqman
Genotyping master mixes
Applied Biosystems™ TaqPath™ ProAmp™ Master Mixes are versatile master mixes developed for high-throughput genotyping and copy number variation (CNV) analysis applications that require accurate results from samples containing PCR inhibitors. TaqPath ProAmp Master Mixes are designed to deliver accurate and reproducible results from genomic DNA targets. The simple workflow and reproducible performance even in the presence of inhibitors offer confidence in results. Find out more at thermofisher.com/proamp
Gene expression analysis master mixes
Depending on your workflow, you may choose to perform reverse transcription and amplification in one or two reactions, and would need a 1-step or 2-step gene expression master mix, respectively. Applied Biosystems™ TaqPath™ qPCR Master Mix, CG, is an ideal reagent for 2-step gene expression. For the best performance, use SuperScript IV VILO Master Mix to prepare cDNA prior to amplification with the TaqPath qPCR Master Mix.
PowerUp SYBR Green Master Mix
The Applied Biosystems™ PowerUp™ SYBR™ Green Master Mix is a preformulated, optimized universal 2X master mix ideal for more economical assays in less demanding applications. Coupled with user-supplied primer sets and templates, PowerUp SYBR Green Master Mix is designed to amplify targets for accurate gene expression analysis. It uses Invitrogen™ SYBR™ Green I dye (a dye that binds to double-stranded DNA) to detect PCR products as they accumulate.
RT-LAMP master mix
Highlights
• Doesn’t require thermal cycler (only heating block)
• Fast turnaround time (15–30 min)
• Multiple options for detection (real-time, endpoint)
• Simple workflow (from sample to result in a few steps)
• Suitable for low-resource or in-field settings Invitrogen™ SuperScript™ IV RT-LAMP Master Mix uses a reverse transcriptase to create a cDNA template from RNA using a DNA polymerase with strong strand displacement activity. This results in fast, simple, and specific amplification under isothermal conditions.
• Includes a proprietary evolved Bst DNA polymerase for high reaction speed RT-LAMP master mix 0 10 20 30 40 50 60 70 100 70 50 30 NTC Time to result (min) Copy number of synthetic SARS-CoV-2 RNA SuperScriptIV RT-LAMP Master Mix NEB WarmStart LAMP Master Mix OptiGene GspSSD2.0 Isothermal Mastermix Lucigen LavaLAMP RNA Master Mix
• Includes SuperScript IV reverse transcriptase: – High tolerance of a variety of inhibitors – Robust and specific cDNA synthesis – Fast reverse transcription reaction
• Optimized reaction buffer to ensure high specificity and sensitivity
• Invitrogen™ RNaseOUT™ inhibitor to prevent RNA degradation
• Can be used to amplify viral RNA (e.g., from measles, influenza, SARS-CoV-2, and other pathogens)
• Compatible with real-time and endpoint detection; includes Invitrogen™ SYTO™ 9 dye for real-time detection
• Convenient single-tube format available, with 100, 400, and 1,000 reactions
Lyo-ready enzymes
Benefits
• High concentration—allows flexibility in final formulations with primers, probes, and excipients
• Cost savings—room-temperature shipping and longer shelf life of the assay
• Performance—same excellent results you expect from wet formulations.
From Invitrogen™ SuperScript™ reverse transcriptases (RTs) to Platinum II Taq DNA Polymerase, we offer a large portfolio of lyo-ready enzyme preparations to meet the performance requirements of RT-qPCR and qPCR assays in dry formats. These enzymes are formulated without glycerol and perform consistently across different formats— standard glycerol, lyo-ready, lyophilized, and reconstituted.
Specially designed Lyo-ready 1-step RT-qPCR system for quantitative analysis of RNA
Specially designed Invitrogen™ 5X Lyo-ready Platinum™ II PCR Buffer, combined with Invitrogen™ Lyo-ready Platinum™ II Taq HotStart DNA Polymerase and Invitrogen™ Lyo-ready SuperScript™ Reverse Transcriptase, is the best choice to obtain the results with reduced time, costs and minimal optimization. The 5X Lyo-ready Platinum II PCR Buffer, formulated with glycerolfree reagents and excipients, and selected lyo-ready enzymes, together provide optimal functionality post-lyophilization and helps to achieve high reaction sensitivity, tolerance of reaction inhibitors, and compatibility with multiplex applications when multiple targets can be detected in the same reaction. This system is suitable for multiplex 1-step RT-qPCR for detection and quantification of viruses and human and other RNA or DNA targets using real-time instruments together with Applied Biosystems™ TaqMan™ Assays with gene-specific primer and probe sets. Both cDNA synthesis and quantitative PCR are performed in a single well. This 1-step RT-qPCR system is eligible for development of COVID-19 detection assays
The 5X Lyo-ready Platinum II PCR Buffer, Lyo-ready Platinum II Taq Hot-Start DNA Polymerase, and Lyo-ready SuperScript Reverse Transcriptase, have been developed with flexibility and speed in mind.
• Multiplexing capability allows testing on a broader range of targets in a single reaction tube
• Tolerance to inhibitors ensures reaction sensitivity and accuracy
• The optimized reaction buffer and stand-alone enzymes allow a reduction in time and recources spent on assay development
Lyo-ready master mixes
Our low-glycerol, lyo-ready qPCR master mixes are one-tube solutions that are ready to be mixed with primers, probes, and excipients, for the subsequent lyophilization step. There is no need for time-consuming development, optimization, and sourcing of multiple separate qPCR reaction components. These master mixes retain the reproducibility, sensitivity, and specificity required for commercial assays. Once lyophilized, the assays demonstrate little to no loss of sensitivity or specificity, and have been shown to reproducibly detect a single copy of target per reaction and provide a linear dynamic range of over 7 orders of magnitude.
Primers, probes, and oligonucleotides
Applied Biosystems™ TaqMan® probes include a minor groove binder (MGB) moiety at the 3ʹ end that increases the primer melting temperature (Tm) of the probe and stabilizes probe–target hybrids, enabling shorter probe length. The nonfluorescent quencher (NFQ) absorbs (quenches) signal from the fluorescent dye label at the other end of the probe. The properties of the NFQ, combined with the short length of the MGB probe, result in lower background signal than with non-MGB NFQ probes. Lower background signal means increased sensitivity and precision in your data. MGB probes and unlabeled primers are also available as analytespecific reagents (ASRs) to help meet requirements for test development. Applied Biosystems™ probe and primer ASRs are manufactured in a registered facility in accordance with current good manufacturing practices (cGMPs) with a quality management system certified to ISO 13485:2003. Applied Biosystems™ TaqMan® QSY™ probes incorporate a proprietary 3ʹ QSY quencher to provide maximal PCR performance in a multiplex format. TaqMan QSY probes are available with Applied Biosystems™ FAM™, VIC™, and our proprietary ABY™ and JUN™ dyes, allowing amplification of up to four targets in a single reaction. All four dyes are optimized for the filter sets on Applied Biosystems™ real-time PCR instruments and work together with minimal spectral overlap for optimal performance. TaqMan Assays are optimized primer and probe sets in one convenient tube. We provide a complete range of customsynthesized oligonucleotide primers and probes, all built to your specifications. Simply identify your target of interest or exact sequence, and our team can design your assay.
Instrumentation
With Applied Biosystems™ thermal cyclers and real-time PCR platforms, you get exceptional value with excellent performance, reliability, and world-class support. When you validate your assay on Applied Biosystems instruments, you can leverage the expansive, global installed base in end-user laboratories, or place our instruments in a reagent rental agreement. As an option, you can even have an Applied Biosystems instrument private-labeled and integrated into your workflow and deliver it to your customers with your own label attached. Your customers will also gain access to the same validation and IQ/OQ services that our direct instrument customers enjoy.
Real-time PCR instruments
The Applied Biosystems family of instruments is designed for compatibility with TaqMan Assays and master mixes. Our genetic analysis instruments, along with a workflow to match your requirements, support your lab’s assay development needs.
“Adding the Applied Biosystems™ QuantStudio™ 5 Real-Time PCR System to the VERSANT™ kPCR Molecular Solution brings a new level of innovation to the market by providing more flexibility and customization to the molecular laboratory workflow. We are excited to strengthen our dedication to molecular laboratory innovations through our partnership with Thermo Fisher Scientific.”
ITALIANO
Trascrittasi inversa
Offriamo un portafoglio completo di trascrittasi inversa (RT), dal virus della leucemia murina Moloney wild-type (M-MuLV) RT alla linea di RT Invitrogen™ SuperScript™ con caratteristiche superiori come maggiore sensibilità e tempo di reazione ridotto.
La nostra tecnologia proprietaria di evoluzione delle proteine in vitro ha consentito l'introduzione di molteplici mutazioni favorevoli nel tradizionale M-MuLV RT. Ciò ha notevolmente migliorato la termostabilità, la tolleranza agli inibitori e la processività dell'enzima.
Benefici
• Prestazioni robuste con campioni impegnativi
• Migliore termostabilità e processività
• Elevata efficienza e sensibilità, anche in presenza di inibitori
• Risultati falsi positivi minimi con DNA della cellula ospite basso
• Compatibilità della liofilizzazione con la formulazione lyo-ready
RT in primo piano: SuperScript IV RT Invitrogen™ SuperScript™ IV RT è un mutante M-MuLV RT con robustezza e affidabilità superiori nella sintesi del cDNA. Questo enzima RT mostra una forte tolleranza agli inibitori, elevata processività, termostabilità, sintesi di cDNA a lunghezza intera altamente efficiente e ridotta attività della RNasi H. SuperScript IV RT dimostra la sua capacità di eseguire una sintesi affidabile di cDNA in presenza di comuni inibitori della reazione PCR, che sono tipici in situazioni in cui non sono disponibili campioni biologici di qualità ottimale.
Mette in risalto
• Robusta sintesi di cDNA con una varietà di bersagli genici, inclusi campioni di RNA e RNA degradati di purezza non ottimale
• Elevata sensibilità e linearità in una reazione di 10 minuti
• Gamma dinamica lineare su un'ampia gamma di input di RNA, cruciale per il rilevamento di target a bassa abbondanza
• Test di qualità approfonditi
DNA polimerasi
Taq DNA polimerasi
Ci dedichiamo a fornire enzimi PCR che soddisfino i requisiti dei clienti più esigenti. La nostra conoscenza ed esperienza in enzimologia ed evoluzione in vitro ci permettono di sviluppare enzimi con proprietà nuove o migliorate. I nostri clienti possono selezionare enzimi da uno spettro di DNA polimerasi in base a una combinazione di tecnologia hot-start, velocità, livello di tolleranza per gli inibitori della PCR o compatibilità della liofilizzazione. Prestazioni elevate, coerenza da lotto a lotto e test di controllo qualità approfonditi consentono la massima sensibilità, accuratezza e riproducibilità dei test PCR e PCR in tempo reale (qPCR) sviluppati con i nostri enzimi.
Benefici
• Elevata sensibilità e specificità per il rilevamento di bersagli di DNA a bassa copia
• Tempo di attivazione minimo per tempi di ottenimento dei risultati più rapidi
• Amplificazione robusta di target difficili da amplificare, compresi quelli di purezza non ottimale
• Disponibili formulazioni compatibili con la liofilizzazione (lyo-ready).
Taq DNA polimerasi in primo piano: DNA polimerasi Platinum II Taq Hot-Start
La DNA polimerasi Invitrogen™ Platinum™ II Taq Hot-Start combina un enzima progettato per la velocità e la tolleranza agli inibitori con un tampone proprietario che consente una temperatura di ricottura del primer universale. Questi attributi, combinati con una solida funzione di avvio a caldo, aprono nuove possibilità nei progetti di analisi basati su DNA e RNA.
Mette in risalto
• Il tampone di ricottura del primer universale riduce i noiosi passaggi di ottimizzazione e aiuta a risparmiare tempo consentendo il co-cycling di tutti i test
• La Taq DNA polimerasi ingegnerizzata consente cicli veloci, anche in presenza di inibitori
• La tecnologia Platinum hot-start offre specificità, sensibilità e rese superiori
• Test di qualità approfonditi
DNA polimerasi ad alta fedeltà
Le DNA polimerasi ad alta fedeltà Thermo Scientific™ e Invitrogen™ sono progettate per amplificare frammenti di DNA con eccezionale robustezza e fedeltà e per generare prodotti PCR con elevata precisione e velocità, anche con i modelli più difficili. Scegli da una raccolta dei nostri enzimi ad alta fedeltà: i loro formati, tamponi e soluzioni dNTP variano a seconda della sofisticazione del tuo test basato sul DNA e delle tue esigenze di flessibilità.
Benefici
• Massima fedeltà sul mercato (>100x Taq polimerasi)
• Amplificazione robusta di target versatili, fino a 20 kb
• Eccezionale tolleranza agli inibitori della PCR
• Tempi di ciclaggio più brevi per tempi di raggiungimento dei risultati più rapidi
• Elevati rendimenti senza ottimizzazione
• Amplificazione non specifica minima
• Disponibile come enzima autonomo od in formato master mix
DNA polimerasi ad alta fedeltà in primo piano: DNA polimerasi Platinum SuperFi II
La DNA polimerasi Invitrogen™ Platinum™ SuperFi™ II è progettata per il successo nella PCR, combinando la massima fedeltà con l'affidabile tecnologia hot-start Invitrogen™ Platinum™. Con una fedeltà >300 volte superiore alla Taq polimerasi, la DNA polimerasi Platinum SuperFi II è ideale per applicazioni che beneficiano della massima precisione di sequenza.
Mette in risalto
• Fedeltà eccezionalmente alta (fedeltà >300 volte superiore rispetto alla Taq polimerasi)
• Elevata specificità e maggiore resa con la tecnologia Platinum hot-start
• Amplificazione robusta di un'ampia gamma di target con tolleranza dei comuni inibitori della PCR
• Comodo flusso di lavoro con configurazione della reazione a temperatura ambiente e stabilità da banco per 24 ore delle reazioni preassemblate
• Test di qualità approfonditi.
EquiPhi29 DNA polimerasi
Thermo Scientific™ EquiPhi29™ DNA Polymerase è un mutante isotermico brevettato della DNA polimerasi phi29 sviluppato attraverso l'evoluzione proteica in vitro. Questo enzima è significativamente migliorato rispetto alla DNA polimerasi phi29 in termini di termostabilità proteica, velocità di reazione, resa del prodotto e bias di amplificazione, pur mantenendo tutti i vantaggi dell'enzima di tipo selvaggio, tra cui alta processività (>70 kb), forte attività di spostamento del filamento e Attività da 3' a 5' di esonucleasi (correzione di bozze) che agisce preferenzialmente su DNA o RNA a singolo filamento.
Mette in risalto
• Bias di amplificazione più basso offerto sul mercato
• Rese estremamente elevate di DNA amplificato, anche da quantità minime di templato
• Sintesi del DNA altamente accurata in un breve lasso di tempo
• Disponibile in formato lyo-ready dNTP di grado PCR
Siamo uno dei pochi produttori primari di nucleotidi. I nostri desossiribonucleosidi trifosfati (dNTP) sono stati ampiamente testati e verificati per l'uso in un'ampia varietà di applicazioni di biologia molecolare, comprese tecniche altamente sensibili come RT-qPCR e sequenziamento di nuova generazione.
Mette in risalto
• Purezza >99% confermata da HPLC
• Prodotto utilizzando apparecchiature dedicate per ogni dNTP
• Privo di contaminanti RNasi, DNasi e inibitori di qPCR, PCR e RT
• Elevata stabilità con una shelf life di 48 mesi a –20°C; stabile dopo >100 cicli di gelo/scongelamento
• Nessuna limitazione alla scala di produzione
• Disponibile come dNTP individuale, set o mix
Master mix qPCR
Master mix PCR in tempo reale
I master mix TaqPath™ e TaqMan® di Applied Biosystems™ forniscono soluzioni chiavi in mano per la PCR in tempo reale. Contengono tampone, dNTP, colorante di riferimento passivo, DNA polimerasi termostabile hot-start e altri componenti formulati per una PCR affidabile basata su 5'nucleasi in tempo reale. Basta aggiungere il campione e i componenti del test TaqMan® e iniziare le reazioni. Offriamo una gamma di master mix PCR in tempo reale ottimizzati per applicazioni specifiche e forniamo master mix TaqMan solo per uso di ricerca (RUO), nonché master mix TaqPath, che sono reagenti per uso generale (GPR), per uso di laboratorio.
Master mix di genotipizzazione
Le master mix TaqPath™ ProAmp™ di Applied Biosystems™ sono miscele master versatili sviluppate per applicazioni di analisi di genotipizzazione e variazione del numero di copie (CNV) ad alto rendimento che richiedono risultati accurati da campioni contenenti inibitori della PCR. Le miscele principali TaqPath ProAmp sono progettate per fornire risultati accurati e riproducibili da target di DNA genomico. Il flusso di lavoro semplice e le prestazioni riproducibili anche in presenza di inibitori offrono fiducia nei risultati. Scopri di più su thermofisher.com/proamp
Master mix di analisi dell'espressione genica
A seconda del flusso di lavoro, è possibile scegliere di eseguire la trascrizione inversa e l'amplificazione in una o due reazioni e sarebbe necessario rispettivamente un master mix di espressione genica a 1 o 2 fasi. Applied Biosystems™ TaqPath™ qPCR Master Mix, CG, è un reagente ideale per l'espressione genica in 2 fasi. Per ottenere le migliori prestazioni, utilizzare SuperScript IV VILO Master Mix per preparare il cDNA prima dell'amplificazione con TaqPath qPCR Master Mix.
PowerUp SYBR Green Master Mix
L'Applied Biosystems™ PowerUp™ SYBR™ Green Master Mix è una master mix universale 2X preformulata e ottimizzata, ideale per saggi più economici in applicazioni meno impegnative. Insieme ai set di primer e ai modelli forniti dall'utente, PowerUp SYBR Green Master Mix è progettato per amplificare i target per un'analisi accurata dell'espressione genica. Utilizza il colorante Invitrogen™ SYBR™ Green I (un colorante che si lega al DNA a doppio filamento) per rilevare i prodotti della PCR mentre si accumulano.
Master mix RT-LAMP
Mette in risalto
• Non necessita di termociclatore (solo blocco riscaldante)
• Tempi di consegna rapidi (15–30 min)
• Opzioni multiple per il rilevamento (in tempo reale, endpoint)
• Flusso di lavoro semplice (dal campione al risultato in pochi passaggi)
• Adatto per impostazioni a basso contenuto di risorse o sul campo Invitrogen™ SuperScript™ IV RT-LAMP Master Mix utilizza una trascrittasi inversa per creare un modello di cDNA dall'RNA utilizzando una DNA polimerasi con una forte attività di spostamento del filamento. Ciò si traduce in un'amplificazione rapida, semplice e specifica in condizioni isoterme.
• Include una DNA polimerasi Bst evoluta proprietaria per una miscela master RT-LAMP ad alta velocità di reazione 0 10 20 30 40 50 60 70 100 70 50 30 NTC Tempo per il risultato (min) Numero di copie di SARS-CoV-2 RNA sintetico SuperScriptIV RT-LAMP Master Mix NEB WarmStart LAMP Master Mix OptiGene GspSSD2.0 Mastermix isotermico Lucigen LavaLAMP RNA Master Mix
• Include una DNA polimerasi Bst evoluta proprietaria per una miscela master RT-LAMP ad alta velocità di reazione 0 10 20 30 40 50 60 70 100 70 50 30 NTC Tempo per il risultato (min) Numero di copie di SARS-CoV-2 RNA sintetico SuperScriptIV RT-LAMP Master Mix NEB WarmStart LAMP Master Mix OptiGene GspSSD2.0 Mastermix isotermico Lucigen LavaLAMP RNA Master Mix
• Include la trascrittasi inversa SuperScript IV: – Elevata tolleranza di una varietà di inibitori – Sintesi di cDNA robusta e specifica – Reazione rapida di trascrizione inversa
• Tampone di reazione ottimizzato per garantire un'elevata specificità e sensibilità
• Inibitore Invitrogen™ RNaseOUT™ per prevenire la degradazione dell'RNA
• Può essere utilizzato per amplificare l'RNA virale (ad es. da morbillo, influenza, SARS-CoV-2 e altri agenti patogeni)
• Compatibile con il rilevamento in tempo reale e degli endpoint; include il colorante Invitrogen™ SYTO™ 9 per il rilevamento in tempo reale
• Comodo formato a provetta singola disponibile, con 100, 400 e 1.000 reazioni
Enzimi Lyo-ready
Benefici
• Alta concentrazione: consente flessibilità nelle formulazioni finali con primer, sonde ed eccipienti
• Risparmio sui costi: spedizione a temperatura ambiente e maggiore durata di conservazione del test
• Prestazioni: gli stessi eccellenti risultati che ci si aspetta dalle formulazioni umide.
Dalle trascrittasi inverse (RT) Invitrogen™ SuperScript™ alla DNA polimerasi Platinum II Taq, offriamo un ampio portafoglio di preparazioni enzimatiche lyo-ready per soddisfare i requisiti di prestazione dei test RT-qPCR e qPCR in formato secco. Questi enzimi sono formulati senza glicerolo e funzionano in modo coerente in diversi formati: glicerolo standard, liofilizzati, liofilizzati e ricostituiti.
Sistema RT-qPCR a 1 fase appositamente progettato per Lyo-ready per l'analisi quantitativa dell'RNA
Il tampone PCR Invitrogen™ 5X Lyo-ready Platinum™ II appositamente progettato, combinato con Invitrogen™ Lyo-ready Platinum™ II Taq HotStart DNA Polymerase e Invitrogen™ Lyo-ready SuperScript™ Reverse Transcriptase, è la scelta migliore per ottenere i risultati in tempi ridotti , costi e ottimizzazione minima. Il 5X Lyo-ready Platinum II PCR Buffer, formulato con reagenti ed eccipienti privi di glicerolo ed enzimi lyo-ready selezionati, insieme forniscono una funzionalità ottimale dopo la liofilizzazione e aiutano a ottenere un'elevata sensibilità di reazione, tolleranza agli inibitori di reazione e compatibilità con applicazioni multiplex quando più bersagli possono essere rilevati nella stessa reazione. Questo sistema è adatto per RT-qPCR multiplex a 1 fase per il rilevamento e la quantificazione di virus e bersagli di RNA o DNA umani e di altro tipo utilizzando strumenti in tempo reale insieme ai saggi TaqMan™ di Applied Biosystems™ con primer e set di sonde specifici per il gene. Sia la sintesi del cDNA che la PCR quantitativa vengono eseguite in un unico pozzetto. Questo sistema RT-qPCR in 1 fase è idoneo per lo sviluppo di test di rilevamento COVID-19
Il 5X Lyo-ready Platinum II PCR Buffer, Lyo-ready Platinum II Taq Hot-Start DNA Polymerase e Lyo-ready SuperScript Reverse Transcriptase, sono stati sviluppati pensando a flessibilità e velocità.
• La capacità di multiplexing consente di eseguire test su una gamma più ampia di target in un'unica provetta di reazione
• La tolleranza agli inibitori garantisce sensibilità e accuratezza di reazione
• Il tampone di reazione ottimizzato e gli enzimi autonomi consentono una riduzione del tempo e delle risorse spese per lo sviluppo del test
Master mix lyo-ready
Le nostre master mix qPCR a basso contenuto di glicerolo e pronte per la liofilizzazione sono soluzioni a una provetta pronte per essere miscelate con primer, sonde ed eccipienti, per la successiva fase di liofilizzazione. Non è necessario lo sviluppo, l'ottimizzazione e l'approvvigionamento in termini di tempo di più componenti di reazione qPCR separati. Queste master mix mantengono la riproducibilità, la sensibilità e la specificità richieste per i saggi commerciali. Una volta liofilizzati, i test dimostrano poca o nessuna perdita di sensibilità o specificità e hanno dimostrato di rilevare in modo riproducibile una singola copia del target per reazione e fornire una gamma dinamica lineare di oltre 7 ordini di grandezza.
Primer, sonde e oligonucleotidi
Le sonde Applied Biosystems™ TaqMan® includono una porzione MGB (minor groove binder) all'estremità 3' che aumenta la temperatura di fusione del primer (Tm) della sonda e stabilizza gli ibridi sonda-bersaglio, consentendo una lunghezza della sonda più breve. Il quencher non fluorescente (NFQ) assorbe (spegne) il segnale dall'etichetta del colorante fluorescente all'altra estremità della sonda. Le proprietà dell'NFQ, combinate con la breve lunghezza della sonda MGB, determinano un segnale di fondo inferiore rispetto alle sonde NFQ non MGB. Un segnale di fondo più basso significa maggiore sensibilità e precisione nei dati. Le sonde MGB e i primer senza etichetta sono disponibili anche come reagenti analitispecifici (ASR) per aiutare a soddisfare i requisiti per lo sviluppo del test. Le sonde e primer ASR Applied Biosystems™ sono prodotti in una struttura registrata in conformità con le attuali buone pratiche di fabbricazione (cGMP) con un sistema di gestione della qualità certificato secondo ISO 13485:2003. Le sonde TaqMan® QSY™ di Applied Biosystems™ incorporano un quencher proprietario 3'QSY per fornire le massime prestazioni della PCR in un formato multiplex. Le sonde TaqMan QSY sono disponibili con Applied Biosystems™ FAM™, VIC™ e i nostri coloranti proprietari ABY™ e JUN™, consentendo l'amplificazione di un massimo di quattro target in una singola reazione. Tutti e quattro i coloranti sono ottimizzati per i set di filtri sugli strumenti per PCR in tempo reale di Applied Biosystems™ e lavorano insieme con una sovrapposizione spettrale minima per prestazioni ottimali. I saggi TaqMan sono set di primer e sonde ottimizzati in una pratica provetta. Forniamo una gamma completa di primer e sonde oligonucleotidiche sintetizzate su misura, tutte costruite secondo le vostre specifiche. Identifica semplicemente il tuo obiettivo di interesse o la sequenza esatta e il nostro team può progettare il tuo test.
Strumentazione
Con i termociclatori Applied Biosystems™ e le piattaforme PCR in tempo reale, ottieni un valore eccezionale con prestazioni eccellenti, affidabilità e supporto di prim'ordine. Quando convalidi il tuo test sugli strumenti Applied Biosystems, puoi sfruttare l'ampia base globale installata nei laboratori degli utenti finali o inserire i nostri strumenti in un contratto di noleggio di reagenti. Come opzione, puoi anche avere uno strumento Applied Biosystems con etichetta privata e integrato nel tuo flusso di lavoro e consegnarlo ai tuoi clienti con la tua etichetta attaccata. I tuoi clienti avranno anche accesso agli stessi servizi di convalida e IQ/OQ di cui godono i nostri clienti diretti di strumenti.
Strumenti per PCR in tempo reale
La famiglia di strumenti Applied Biosystems è progettata per la compatibilità con i saggi TaqMan e i master mix. I nostri strumenti di analisi genetica, insieme a un flusso di lavoro per soddisfare le tue esigenze, supportano le esigenze di sviluppo del test del tuo laboratorio.
“L'aggiunta del sistema Applied Biosystems™ QuantStudio™ 5 Real-Time PCR System alla soluzione molecolare VERSANT™ kPCR porta un nuovo livello di innovazione sul mercato fornendo maggiore flessibilità e personalizzazione al flusso di lavoro del laboratorio molecolare. Siamo entusiasti di rafforzare la nostra dedizione alle innovazioni dei laboratori molecolari attraverso la nostra partnership con Thermo Fisher Scientific".
Da:
https://offers.the-scientist.com/hubfs/TS_PPL_Thermo%20Fisher_GSD_Handbook/PG2404-PJT7561-COL018000-Rev-MDx-PCR-Handbook-Global-FWR%20(1)%20(1).pdf?hsCtaTracking=d2e26557-42c2-45ab-819f-fbe0a10f37cb%7C9824b23a-b9ae-4698-b508-0149c25ffdfb
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