HPLC-Charged Aerosol Detection: CAD – Working principles / Rilevamento di aerosol con carica HPLC: CAD – Principi di funzionamento

HPLC-Charged Aerosol Detection: CAD – Working principles / Rilevamento di aerosol con carica HPLC: CAD – Principi di funzionamento

Segnalato dal Dott. Giuseppe Cotellessa / Reported by Dr. Giuseppe Cotellessa

Schematic of CAD technology / Schema della tecnologia CAD

Three simple steps to charged aerosol detection

 1. Nebulization

 Charged aerosol detection begins by nebulizing the column eluent into droplets, which are subsequently dried into particles. The particle size increases with the amount of analyte. 

2. Charging 

In the mixing chamber a stream of ionized nitrogen gas collides with the analyte particles. The charge is then transferred to the particles—the larger the particle, the greater the charge.

 3. Detection 

The charged particles are transferred to a collector where the aggregate charge is measured by a highly sensitive electrometer. This generates a signal directly proportional to the quantity of analyte present.

Superior results achieved through high quality columns 

Excipient analysis can encompass a wide variety of analytes. The more you know about your sample, the easier it will be to select the best chemistry for separation. Thermo Scientific offers a wide range of bonded phases, particle sizes, particle morphologies and column dimensions to meet any application need so you can achieve maximum resolution for your excipients, active pharmaceutical ingredients (APIs) or impurity profiling analyses. When selecting a column, the first step to consider is sample load. Both the Thermo Scientific™ Hypersil™ GOLD column family and Thermo Scientific™ Acclaim™ column family are fully porous, allowing for high resolution of complicated sample matrices and large injection volumes. In cases of limited sample volume, the Thermo Scientific™ Accucore™ column family should be selected. Accucore consists of superficially porous (solid core) particles that provide greater signalto-noise with smaller injection volumes or for UHPLC separations without elevated system backpressure. For most analytes, the hydrophobic properties of the column governs the separation. Please keep the following rules of thumb in mind when selecting a column: 

• While C18 is the most common phase selected in method development, consider hydrophobic retention trends with the carbon load on the column: C1 < C4 < C8 < C18 / C30. In the case of highly aliphatic hydrocarbons (lipids), the Thermo Scientific™ Acclaim™ C30 columns and Thermo Scientific™ Accucore™ C30 columns offer greater selectivity with shorter run times compared to a traditional C18.

• Select a wider pore silica column (Thermo Scientific™ Acclaim™ 300 C18 column or Thermo Scientific™ Accucore™ 150 C18 column) to minimize sample carryover when working with compounds of large molecular weight (>4kDa).

 • Achieve greater retention of moderately polar analytes (including basic compounds) by selecting a polar embedded column, such as the Thermo Scientific™ Acclaim™ PA2 column or Thermo Scientific™ Accucore™ Polar Premium column. 

• Enhance steric selectivity and resolution of aromatic compounds with phenyl based columns, including the Thermo Scientific™ Accucore™ Biphenyl column or Thermo Scientific™ Hypersil™ GOLD PFP column 

• Separate APIs from counter-ions with the Thermo Scientific™ Acclaim™ Trinity P1 column and Thermo Scientific™ Acclaim™ Trinity P2 column. Engineered to provide controlled ion exchange and RP/HILIC properties, the Trinity line works well for samples that show a mix of ion exchange and hydrophobic/hydrophilic properties. 

ITALIANO

Tre semplici passaggi per il rilevamento di aerosol carichi

 1. Nebulizzazione

 Il rilevamento dell'aerosol carico inizia nebulizzando l'eluente della colonna in goccioline, che vengono successivamente essiccate in particelle. La dimensione delle particelle aumenta con la quantità di analita.

2. Ricarica

Nella camera di miscelazione un flusso di azoto gassoso ionizzato entra in collisione con le particelle di analita. La carica viene quindi trasferita alle particelle: più grande è la particella, maggiore è la carica.

 3. Rilevamento

Le particelle cariche vengono trasferite ad un collettore dove la carica aggregata viene misurata da un elettrometro altamente sensibile. Questo genera un segnale direttamente proporzionale alla quantità di analita presente.

Risultati superiori ottenuti grazie a colonne di alta qualità

L'analisi degli eccipienti può comprendere un'ampia varietà di analiti. Più conosci il tuo campione, più facile sarà selezionare la migliore chimica per la separazione. Thermo Scientific offre un'ampia gamma di fasi legate, dimensioni delle particelle, morfologie delle particelle e dimensioni delle colonne per soddisfare qualsiasi esigenza applicativa in modo da poter ottenere la massima risoluzione per gli eccipienti, i principi attivi farmaceutici (API) o le analisi del profilo delle impurità. Quando si seleziona una colonna, il primo passaggio da considerare è il caricamento del campione. Sia la famiglia di colonne Thermo Scientific™ Hypersil™ GOLD che la famiglia di colonne Thermo Scientific™ Acclaim™ sono completamente porose, consentendo un'elevata risoluzione di matrici di campioni complicate e grandi volumi di iniezione. In caso di volume di campione limitato, selezionare la famiglia di colonne Thermo Scientific™ Accucore™. Accucore è costituito da particelle superficialmente porose (nucleo solido) che forniscono un maggiore segnale-rumore con volumi di iniezione più piccoli o per separazioni UHPLC senza contropressione elevata del sistema. Per la maggior parte degli analiti, le proprietà idrofobiche della colonna determinano la separazione. Si prega di tenere a mente le seguenti regole pratiche quando si seleziona una colonna:

• Sebbene C18 sia la fase più comune selezionata nello sviluppo del metodo, considerare le tendenze di ritenzione idrofobica con il carico di carbonio sulla colonna: C1 < C4 < C8 < C18 / C30. Nel caso di idrocarburi altamente alifatici (lipidi), le colonne Thermo Scientific™ Acclaim™ C30 e Thermo Scientific™ Accucore™ C30 offrono una maggiore selettività con tempi di analisi più brevi rispetto a un C18 tradizionale.

• Selezionare una colonna di silice a pori più larghi (colonna Thermo Scientific™ Acclaim™ 300 C18 o colonna Thermo Scientific™ Accucore™ 150 C18) per ridurre al minimo il carryover del campione quando si lavora con composti di grande peso molecolare (>4kDa).

 • Ottieni una maggiore ritenzione di analiti moderatamente polari (compresi i composti di base) selezionando una colonna incorporata polare, come la colonna Thermo Scientific™ Acclaim™ PA2 o la colonna Thermo Scientific™ Accucore™ Polar Premium.

• Migliora la selettività sterica e la risoluzione dei composti aromatici con colonne a base fenilica, inclusa la colonna Thermo Scientific™ Accucore™ Biphenyl o la colonna Thermo Scientific™ Hypersil™ GOLD PFP

• Separare le API dai controioni con la colonna Thermo Scientific™ Acclaim™ Trinity P1 e la colonna Thermo Scientific™ Acclaim™ Trinity P2. Progettata per fornire scambio ionico controllato e proprietà RP/HILIC, la linea Trinity funziona bene per campioni che mostrano un mix di scambio ionico e proprietà idrofobiche/idrofile.

Da:

https://cdn2.hubspot.net/hubfs/547446/Technology%20Networks/Landing%20Pages/Thermo/Kris/Feb%202020/Thermo_HPLC-Charged%20Aerosol%20Detection%20eBook.pdf?__hstc=8807082.074aceb79027e793890018c0152531d2.1643566337753.1654471265217.1654549953896.51&__hssc=8807082.1.1654549953896&__hsfp=4108544744&hsCtaTracking=6e740ac2-78a4-468d-89dd-6ceabca99dd8%7Cc3c83273-f23f-43a6-a96d-fe9d33b9fbc6