GENIO italiano Giuseppe Cotellessa

Characterizing Irreversible Inhibitors Using Pioneer SPR Assays /  Caratterizzazione degli inibitori irreversibili mediante saggi SPR Pioneer Segnalato dal Dott. Giuseppe Cotellessa / Reported by Dr. Giuseppe Cotellessa Figure : Amine-PEG4-desthiobiotin is coupled to an amine reaction biosensor to create a desthiobiotin sensor surface. The biotin-labeled target is then captured using streptavidin and immobilized onto the desthiobiotin sensor surface for analysis with covalent inhibitors. The target-inhibitor complex is then regenerated using an acetonitrile: NaOH mixture. The surface can then be re-immobilized with fresh target for multiple rounds of covalent inhibitor analysis. / L'ammina-PEG4-destiobiotina è accoppiata ad un biosensore di reazione dell'ammina per creare una superficie del sensore di destiobiotina. Il target marcato con biotina viene quindi catturato utilizzando streptavidina ed immobilizzato sulla superficie del sensore della destiobiotina per l'analis...

Quantitation on Octet® BLI Platforms /  Quantificazione su piattaforme Octet® BLI Segnalato dal Dott. Giuseppe Cotellessa / Reported by Dr. Giuseppe Cotellessa Figure. Octet® quantitation assay formats and features / Formati e caratteristiche del test di quantificazione Octet® Octet® platforms offer an excellent solution to replace assays that are currently performed as ELISA. Similar to ELISA, Octet® assays are carried out on an immobilized surface (solid support in ELISA), and the analyte is bound from solution. However, Octet® assays are fully automated, require much less user intervention, and provide a simplified workflow. In addition, they provide researchers with the flexibility to choose the most efficient assay format based on assay needs such as sensitivity, dynamic range, and workflow.  Advantages of Octet® quantitation assays over ELISA:  - Multiple assay formats – depending on the required sensitivity of the assay, several assay formats can be...

Analysis on FC-Gamma Receptor Interactions in Octet® Platforms /  Analisi sulle interazioni del recettore FC-Gamma nelle piattaforme Octet® Segnalato dal Dott. Giuseppe Cotellessa / Reported by Dr. Giuseppe Cotellessa Figure: Workflow of a FcRn-hIgG kinetic assay using anti-human FAB2G Biosensors. (A) hIgG is immobilized and FcγRIIIa is introduced as the analyte. Other commonly used biosensor chemistries are Ni-NTA and Streptavidin. (B) Kinetic analysis using a 1:1 interaction model to determine kinetics and affinity. (C) Steady state analysis using data represented in (B). Steady state (end-point) analysis can also be useful especially in low affinity interactions or for systems that produces very fast on-rates. / Flusso di lavoro di un test cinetico FcRn-hIgG utilizzando biosensori FAB2G anti-umani. (A) hIgG viene immobilizzato e FcγRIIIa viene introdotto come analita. Altre sostanze chimiche biosensoriali comunemente utilizzate sono Ni-NTA e Streptavidina. (B) Analisi...

Epitope Binning or Cross-Competition Assays on Octet® BLI Systems /  Epitope Binning o saggi di competizione incrociata sui sistemi Octet® BLI Segnalato dal Dott. Giuseppe Cotellessa / Reported by Dr. Giuseppe Cotellessa Figure: Octet® epitope binning assay formats: (A) In-tandem assay. Antigen is immobilized onto the biosensor followed by binding with saturating conditions on mAb1 and competing with mAb2. (B) Classical sandwich format. mAb1 is immobilized onto the biosensor followed by antigen capture by mAb1. mAb2 is then used to test for antigen binding. (C) Premix assay. One mAb is immobilized on the biosensor and bound with pre-bound antigen-mAb1 complex. Premix assay format is typically used to clarify ambiguous results obtained from other binning formats. /  Formati del test di binning dell'epitopo Octet®: (A) Test in tandem. L'antigene viene immobilizzato sul biosensore seguito dal legame con condizioni di saturazione su mAb1 e competendo con mAb2. (B) Format...

Why Use Label-Free Detection for Binding Interaction Analysis? /  Perché utilizzare il rilevamento senza etichetta per l'analisi dell'interazione di rilegatura? Segnalato dal Dott. Giuseppe Cotellessa / Reported by Dr. Giuseppe Cotellessa Figure 1: Octet® sytems with BLI technology measure the difference in reflected light’s wavelength (Δλ) between the two surfaces on the biosensor. / Il sistema Octet® con tecnologia BLI misura la differenza di lunghezza d'onda della luce riflessa (Δλ) tra le due superfici sul biosensore. Interactions between biomolecules serve as key triggers for many biological processes and, therefore, provide perfect targets for drug discoveries. Biological binding interactions are a dynamic process driven by changes to the environment. Therefore, techniques used to characterize these interactions needs to mirror the level of biological complexity in order to fully understand these systems. Label-Free Biosensor Binding Assay Methods Commonly used lab...

Tecnologie di smistamento cellulare: approcci consolidati e nuovi /  Cell Sorting Technologies: Established and Novel Approaches Segnalato dal Dott. Giuseppe Cotellessa / Reported by Dr. Giuseppe Cotellessa Tecnologia BACS.  Le microbolle catturano le cellule bersaglio all'interno di un campione, che poi galleggiano in superficie per la rimozione. /   Tecnologia BACS.  Le microbolle catturano le cellule bersaglio all'interno di un campione, che poi galleggiano in superficie per la rimozione.  Immagine fornita da Akadeum. Tradizionalmente, lo smistamento cellulare è stato utilizzato per lo sviluppo di saggi cellulari, come quelli coinvolti nella valutazione di potenziali farmaci candidati.  Tuttavia, lo smistamento cellulare è stato sfruttato per molte altre applicazioni negli ultimi anni, guidato in gran parte dall'emergere di nuove tecnologie di smistamento.  Questo articolo fornisce un rapido riepilogo dei metodi consolidati per l'ordiname...